31

bd平台的单细胞转录组一定能捕获到中性粒细胞吗

看到了《单细胞天地》公众号分享了一个学徒实战的笔记,详见:BD平台单细胞的优点都被你弄丢了,那个肺癌的免疫治疗数据集在GSE207422,很容易读取作者给出来了的表达量矩阵后进行降维聚类分群,然后我看了看结果里面的中性粒细胞种qc指标都很差,确实很容易被忽视。。。。 Continue reading

31

BD平台单细胞的优点都被你弄丢了

因为众所周知的原因(详见: 很抱歉我这里没有朝九晚五 ,以及得了吧,不缺你这点关注 ),我现在是没有实习生了。但是我还有学徒,所以可以在培养 他们的同时,给他们布置一些数据分析实战任务。

这次我给学徒布置了一个非小细胞肺癌的免疫治疗的单细胞转录组数据,文章是2023的《Tumor microenvironment remodeling after neoadjuvant immunotherapy in non-small cell lung cancer revealed by single-cell RNA sequencing》,因为我注意到里面的降维聚类分群有大量的中性粒细胞,如下所示: Continue reading

31

10x的空间单细胞文件格式详解

虽然现在(2023年12月30日)空间单细胞技术已经是百花齐放了,主要是基于测序的10x Genomics Visium平台和Slide-seq技术,另外基于成像的技术也有一点点市场,比如:seqFISH+、MERFISH、 NanoString GeoMx Digital Spatial Profiler (DSP),还有其它小众产品就不值得一提啦。

是否需要 spaceranger count 的定量过程 Continue reading

11

10X这样的单细胞转录组里面的非编码基因信息很难挖掘

数据挖掘真的是把人逼到花样百出,我们《生信技能树》作为华语圈生物信息学自媒体界扛把子自然也是被各种开脑洞的思路“骚扰”着,不过大家请不要无限制的怼我的私人微信哈,如果提问,在公众号推文文末留言即可,或者发邮件给我,我的邮箱是 jmzeng1314@163.com

最近收到一个有意思的留言,是关于10X这样的单细胞转录组里面的非编码基因的, 目前绝大部分表达量矩阵都是以基因名字为单位,很容易区分成为编码和非编码,我们仍然是以 pbmc3k 这个数据集举例子哈。 Continue reading

11

10x官网下载pbmc3k的bam文件走定量流程

最近各个交流群总是看到大家询问一些单细胞公共数据集处理,居然是从bam文件开始,可能是因为都是从ENA数据库下载吧。

比如文章:《Defining the emergence of myeloid-derived suppressor cells in breast cancer using single-cell transcriptomics》,其数据在 https://www.ebi.ac.uk/ena/browser/view/PRJNA578550?show=readsContinue reading

十二 27

4个基因如何做go和kegg数据库注释

看到公众号后台有人这样提问:4个基因如何做go和kegg数据库注释!

我觉得这样的问题蛮好玩,说明初学者很容易被各种各样的高大上的数据分析项目给误导,以为go和kegg数据库注释是什么了不得的高级分析,或者说不知道为什么要做,也不知道它可以解决什么问题,仅仅是想搞一下高大上的图表而已。 Continue reading

12

10x的单细胞转录组fastq文件的R1和R2不能弄混哦

12

10x的单细胞ATAC上游流程之cellranger-atac

前面我们组建的《 单细胞多组学上下游全打通 》的微信交流群,提到了该文章的数据集PRJNA768891里面的 atac的10x的单细胞,在ena下载是没有用的,必须去ncbi的sra下载,然后自己转fq文件。见:单细胞数据在ENA数据库和NCBI的SRA是有区别的

软件和数据库文件都需要自己在10x的官网简单的注册后免费的下载和安装: Continue reading