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	<title>生信菜鸟团 &#187; GSNAP</title>
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		<title>用 GMAP/GSNAP软件进行RNA-seq的alignment</title>
		<link>http://www.bio-info-trainee.com/1016.html</link>
		<comments>http://www.bio-info-trainee.com/1016.html#comments</comments>
		<pubDate>Thu, 24 Sep 2015 14:22:13 +0000</pubDate>
		<dc:creator><![CDATA[ulwvfje]]></dc:creator>
				<category><![CDATA[转录组软件]]></category>
		<category><![CDATA[GSNAP]]></category>
		<category><![CDATA[RNA]]></category>
		<category><![CDATA[比对]]></category>

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		<description><![CDATA[软件发表在：http://bioinformatics.oxfordjourna &#8230; <a href="http://www.bio-info-trainee.com/1016.html">Continue reading <span class="meta-nav">&#8594;</span></a>]]></description>
				<content:encoded><![CDATA[<div>
<div>软件发表在：<a href="http://bioinformatics.oxfordjournals.org/content/26/7/873.abstract">http://bioinformatics.oxfordjournals.org/content/26/7/873.abstract</a></div>
<p>软件的解说ppt ：<a href="http://www.mi.fu-berlin.de/wiki/pub/ABI/CompMethodsWS11/MHuska_GSNAP.pdf">http://www.mi.fu-berlin.de/wiki/pub/ABI/CompMethodsWS11/MHuska_GSNAP.pdf</a></p>
<div>一个例子：<a href="http://qteller.com/RNAseq-analysis-recipe.pdf">http://qteller.com/RNAseq-analysis-recipe.pdf</a></div>
<div>一个shell脚本 ： <a href="https://github.com/vsbuffalo/rna-seq-example">https://github.com/vsbuffalo/rna-seq-example</a></div>
<div>软件的下载地址： <a href="http://research-pub.gene.com/gmap/">http://research-pub.gene.com/gmap/</a></div>
<div>有研究者认为这个软件的比对效果要比tophat要好，虽然现在已经多出来了非常多的RNA-seq的alignment软件，我还是简单看看这个软件吧，它本来是2005就出来的一个专门比对低通量的est序列，叫GMAP，后来进化成了GSNAP</div>
<div>step1：下载安装GMAP/GSNAP</div>
<div>wget <a href="http://research-pub.gene.com/gmap/src/gmap-gsnap-2015-09-21.tar.gz">http://research-pub.gene.com/gmap/src/gmap-gsnap-2015-09-21.tar.gz</a></div>
</div>
<div>是一个标准的linux源码程序，安装之前一定要看readme  ，<a href="http://research-pub.gene.com/gmap/src/README">http://research-pub.gene.com/gmap/src/README</a></div>
<div>解压进去，然后源码安装三部曲,首先 ./configu  然后make 最后make install</div>
<div>会默认安装在 /usr/local/bin 下面，这里需要修改，因为你可能没有 /usr/local/bin 权限,安装到自己的目录，然后把它添加到环境变量！</div>
<div></div>
<div>step2 ：准备数据</div>
<div>比对一般都只需要两个数据，一是索引好的参考基因组，另一个是需要比对的测序数据。</div>
<div>但是这个GSNAP，还需要对应的GTF注释文件。</div>
<div>首先需要参考基因组：虽然软件本身提供了一个hg19的参考基因组，并且已经索引好了<a href="http://research-pub.gene.com/gmap/genomes/hg19.tar.gz">Human genome, version hg19 (5.5 GB)</a>(http://research-pub.gene.com/gmap/genomes/hg19.tar.gz) ，但是下载很慢，而且不是对所有版本的GSNAP都适用。所以我这里对我自己的参考基因组进行索引。</div>
<div>gmap_build -D ./ -d  my_hg19.fa</div>
<div>然后取ensemble下载hg19的gtf文件。</div>
<div>然后还需要把自己下载的gtf文件也构建索引，需要两个步骤</div>
<div>cat my_hg19.gtf |  ~/software/gmap-2011-10-16/util/gtf_splicesites &gt;<span class="Apple-converted-space"> </span>my_hg19.splicesites</div>
<div>cat  my_hg19.splicesites <span class="Apple-converted-space"> </span>|   iit_store -o<span class="Apple-converted-space"> </span>my_hg19.gtf.index</div>
<div>然后拷贝需要比对的RNA-seq测序文件</div>
<div></div>
<div>step3: 运行程序</div>
<div>就是一步比对而已</div>
<div>
<div data-canvas-width="408.51666666666677">gsnap</div>
<div data-canvas-width="408.51666666666677">-D /home/jschnable/gsnap_indexes/</div>
<div data-canvas-width="408.51666666666677">-d arabidopsisv10</div>
<div data-canvas-width="11.05">--nthreads=50</div>
<div data-canvas-width="11.05">-B 5</div>
<div data-canvas-width="11.05">-s  /home/jschnable/gsnap_indexes/arabidopsisv10.iit</div>
<div>-n 2</div>
<div>-Q</div>
<div>--nofails</div>
<div data-canvas-width="11.2">--format=sam temp.fastq</div>
<div data-canvas-width="88.01666666666667">&gt; results.sam</div>
<div data-canvas-width="88.01666666666667">参数有点多，自己看看说明书吧<a href="http://qteller.com/RNAseq-analysis-recipe.pdf">http://qteller.com/RNAseq-analysis-recipe.pdf</a> 讲的非常详细。</div>
</div>
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