简并碱基对应表格如下；

R:ag
Y:CT
M:AC
K:GT
S:gc
W:AT
H:atc
B:gtc
V:gac
D:GAT
N:ATgc
把这个文本拷贝到txt文件里面保存好，或者直接写入hash里面也行！

[perl]

open FH,"ATCG.txt";

while(<FH>){

chomp;

@F=split/:/;

$hash{$F[0]}=uc $F[1];#右边就是简并表格

}

open FH1,"primer.txt";

while(<FH1>){

next if />/;

chomp;

primer2multiple($_); #对每个含有简并碱基的引物都进行以下函数处理

}

sub primer2multiple{

$primer=$_[0];

$prod=1;

$primer_len=length $primer ;

foreach $i (0..$primer_len-1){

$char=substr($primer,$i,1);

if ($char !~/[ATCG]/){$prod*=length $hash{$char}}

}

$new="";

foreach $i (0..$primer_len-1){

$char=substr($primer,$i,1);

if ($char =~/[ATCG]/){$new.=$char x $prod}

else {$tmp=length $hash{$char};$new.=$hash{$char} x ($prod/$tmp)}

}

die "error!" if   $primer_len*$prod != length $new ;

foreach $i (0..$prod-1){

$tmp="";

for(my $j=$i;$j<(length($new));$j+=$prod){$tmp.=substr($new,$j,1)}

print "$tmp\n";

}

}

[/perl]

可以直接调用这个函数即可primer2multiple('ATGCVHGT');

就可以看到简并碱基被替换啦，就是那个V和H

ATGCGAGT
ATGCATGT
ATGCCCGT
ATGCGAGT
ATGCATGT
ATGCCCGT
ATGCGAGT
ATGCATGT
ATGCCCGT